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2024年农学考研植物生理生化复习:核酸的理化性质
1.核酸的一般性质
溶解性、酸碱水解性、沉降性。粘度 DNA 和 RNA 含有极性基团,均微溶于水,它们的钠盐在水中溶解度较大。核酸不溶于乙醇、乙醚等有机溶剂。DNA 中的磷酸二酯键对碱不敏感,而 RNA 很容易被 NaOH 稀溶液随机水解。DNA 溶液粘度非常高;RNA 溶液的粘度比 DNA 溶液小得多。
2.核酸的紫外吸收特征
核酸溶液在 260 nm 附近有一个较大吸收峰,在 230 nm 有一个低谷,RNA 的吸收光谱与 DNA 无显著差别。
3.核酸的变性及复性
1)变性:在一定条件下,受到某些物理和化学因素的作用,DNA 的双螺旋结构破坏,氢键断裂,碱基有规律的堆积被破坏,双螺旋松散,双链分离成两条缠绕的无定形的多核苷酸单链的过程称为变性。
2)复性:变性 DNA 在适当条件下,两条分开的互补单链重新形成双螺旋结构的过程称为复性。缓慢冷却复性的过程称为退火。
3)增色效应与减色效应、熔解温度、分子杂交的概念
A增色效应:变性 DNA 分子双螺旋结构破坏,碱基充分外露,其紫外吸收增加的现象。
B减色效应:变性 DNA 分子复性重新形成双螺旋结构,其紫外吸收降低的现象。
C熔解温度 Tm:DNA 变性时,OD260 增大。通常把加热变性使 DNA 双螺旋结构失去一半时的温度称为该 DNA 的熔解温度,或者当增色效应达到一半时的温度。
D核酸的分子杂交:来源不同的两条具有碱基互补序列的单链核酸分子,通过退火复性,碱基互补区段按照碱基配对原则结合在一起形成双链的过程称为核酸的分子杂交。杂交过程可以发生在 DNA 单链之间、RNA 单链之间以及 DNA 单链与 RNA 单链之间。
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